申请/专利权人:浙江工业大学
申请日:2022-03-10
公开(公告)日:2024-04-05
公开(公告)号:CN114703158B
主分类号:C12N9/10
分类号:C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/60;C12P19/18;C12R1/19
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.04.05#授权;2022.07.22#实质审查的生效;2022.07.05#公开
摘要:本发明涉及一种提高转糖基活性和提升L‑抗坏血酸葡萄糖苷产物L‑抗坏血酸‑2‑α‑葡萄糖苷(2‑O‑α‑D‑glucopyranosyl‑L‑ascorbicacid,AA‑2G)纯度的蔗糖磷酸化酶突变体及其应用。本发明通过对SEQID.1所示氨基酸序列第134位脯氨酸、第341位亮氨酸和第343位亮氨酸中的一种或多种进行单点突变或多点组合突变,使得蔗糖磷酸化酶突变体比酶活提升1~2倍,合成AA‑2G浓度可达205gL,合成L‑抗坏血酸糖苷产物中AA‑2G占比达92~99%,这些突变体具有更好的工业应用特性。
主权项:1.一种蔗糖磷酸化酶突变体,其特征在于所述蔗糖磷酸化酶突变体为下列之一:(1)氨基酸序列如SEQIDNO.1所示蔗糖磷酸化酶第134位脯氨酸突变为半胱氨酸;(2)氨基酸序列如SEQIDNO.1所示蔗糖磷酸化酶第341位亮氨酸突变为异亮氨酸;(3)氨基酸序列如SEQIDNO.1所示蔗糖磷酸化酶第341位的亮氨酸突变为缬氨酸;(4)氨基酸序列如SEQIDNO.1所示蔗糖磷酸化酶第343位的亮氨酸突变为异亮氨酸;(5)氨基酸序列如SEQIDNO.1所示蔗糖磷酸化酶第341位的亮氨酸突变为异亮氨酸,第343位的亮氨酸突变为异亮氨酸;(6)氨基酸序列如SEQIDNO.1所示蔗糖磷酸化酶第341位的亮氨酸突变为异亮氨酸,第343位的亮氨酸突变为脯氨酸;(7)氨基酸序列如SEQIDNO.1所示蔗糖磷酸化酶第341位的亮氨酸突变为缬氨酸,第343位的亮氨酸突变为脯氨酸;(8)氨基酸序列如SEQIDNO.1所示蔗糖磷酸化酶第341位的亮氨酸突变为异亮氨酸,第343位的亮氨酸突变为天冬酰胺。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 浙江工业大学 一种蔗糖磷酸化酶突变体、编码基因及其应用
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