申请/专利权人：苏州健雄职业技术学院

申请日：2024-01-15

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN117867030A

主分类号：C12N15/867

分类号：C12N15/867;C12N15/53;C12N5/10;C12N5/09;C12N5/071;C12Q1/02;A01K67/0271

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要：本发明属于生物医药领域，具体公开了一种小鼠肺癌细胞系CMT167荧光素酶稳转细胞株的构建、筛选以及体内建模的方法。本发明利用慢病毒载体将荧光素酶LUC转染入CMT167小鼠肺癌细胞，经单克隆筛选后获得稳定表达LUC的CMT167细胞株，同时利用原位接种技术构建小鼠体内模型。利用本方法建立的稳转细胞株通过原位移植至小鼠体内，可以实时监测和评估CMT167小鼠肺癌的发生、发展、浸润、转移及相应治疗措施的治疗效果，并达到活体动物体内示踪的目的，应用该细胞株制备的小鼠原位模型在肺癌的发生发展机制研究、治疗药物筛选及不同治疗方案筛选中具有极佳的应用前景。

主权项：1.一种小鼠肺癌细胞系CMT167荧光素酶稳转细胞株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.构建含有荧光素酶的慢病毒载体：合成萤光素酶编码区的序列，然后将其克隆到慢病毒载体中；S2.将含有荧光素酶的慢病毒载体和包装质粒，共同转染入病毒宿主细胞，扩增病毒，并收集病毒毒液；S3.将收集的慢病毒毒液转染CMT167小鼠肺癌细胞，并通过连续稀释分离单个克隆细胞，加入荧光素酶底物D-luciferin进行荧光素酶活性检测，筛选出稳定表达LUC的CMT167荧光素酶稳转细胞株CMT167-LUC。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 苏州健雄职业技术学院 小鼠肺癌细胞系CMT167荧光素酶稳转细胞株的构建与应用

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