申请/专利权人：温州大学

申请日：2022-08-10

公开（公告）日：2023-07-21

公开（公告）号：CN115267025B

主分类号：G01N30/06

分类号：G01N30/06;G01N30/74;G01N21/64

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.07.21#授权;2022.11.18#实质审查的生效;2022.11.01#公开

摘要：本发明属于医药技术领域，具体涉及一种测定载四甲基七叶葶菌蜕的载药量和载药情况的方法。该方法包括以下步骤：制备菌蜕；制备载药菌蜕；采用SDS裂解超声破碎法对载药菌蜕进行破碎；采用HPLC检测载药菌蜕的载药量；显微镜观察载药菌蜕的载药情况。同时，本发明提供了一种定量检测四甲基七叶葶的HPLC方法，绘制标准曲线，通过峰面积计算四甲基七叶葶的含量，该方法的色谱条件为：以C18‑AQ色谱柱为固定相，以流动相A和流动相B为流动相进行梯度洗脱，其中流动相A为磷酸溶液，流动相B为乙腈溶液；检测波长为254nm，该方法操作简单，灵敏度高，检测结果精准度高。

主权项：1.一种测定搭载四甲基七叶葶的ECN菌蜕的载药量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1：制备菌蜕；S2：制备载药菌蜕；S3：采用SDS裂解超声破碎法对S2所得载药菌蜕进行破碎；S4：采用HPLC方法检测载药菌蜕的载药量；S5：显微镜观察所述载药菌蜕的载药情况；所述S3中，SDS裂解液由EDTA、SDS和Tris-HCl缓冲液组成，所述EDTA浓度为1mM，所述Tris-HCl缓冲液浓度为50mM，所述SDS质量分数为5％；所述HPLC方法包括以下步骤：1配制甲基七叶葶的标准品A-E，HPLC检测，绘制标准曲线；2配制甲基七叶葶的待测样品，HPLC检测，得到待测样品的峰面积；3根据步骤2所得峰面积，计算四甲基七叶葶的含量；所述HPLC方法的色谱条件为：以C18-AQ色谱柱为固定相，以流动相A和流动相B为流动相进行梯度洗脱，所述流动相A为磷酸溶液，所述流动相B为乙腈溶液；检测波长为254nm；所述梯度洗脱程序为：在0分钟，设置流动相A体积分数为80％，流动相B体积分数为20％；在7分钟，设置流动相A体积分数为20％，流动相B体积分数为80％；在10分钟，设置流动相A体积分数为20％，流动相B体积分数为80％；在15分钟，设置流动相A体积分数为80％，流动相B体积分数为20％；在20分钟，设置流动相A体积分数为80％，流动相B体积分数为20％。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 温州大学 测定载四甲基七叶葶菌蜕的载药量和载药情况的方法

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