申请/专利权人：普瑞斯新(上海)生物医疗科技有限公司

申请日：2021-12-28

公开（公告）日：2024-02-23

公开（公告）号：CN114214412B

主分类号：C12Q1/6886

分类号：C12Q1/6886;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.02.23#授权;2022.04.08#实质审查的生效;2022.03.22#公开

摘要：本发明涉及一种PIK3CA基因和BRAF基因突变多重检测引物探针及其试剂盒包括检测PIK3CA基因和BRAF基因20号外显子T790M突变的上游引物F‑T790M、下游引物R‑T790M、野生型探针WP‑T790和突变型探针MP‑T790M，检测PIK3CA基因和BRAF基因21号外显子L858R突变的上游引物F‑L858R、下游引物R‑L858R、野生型探针WP‑L858和突变型探针MP‑L858R，以及检测PIK3CA基因和BRAF基因19号外显子片段缺失突变的上游引物F‑E19del、下游引物R‑E19del、野生型探针WP‑E19和突变型探针MP‑E19del。本发明的PIK3CA基因和BRAF基因突变多重检测引物探针及其试剂盒快速高效，标准品的配制简单，检测体系的特异性与灵敏度高，游离DNA的利用率高，准确度高。

主权项：1.一种PIK3CA基因和BRAF基因突变多重检测引物探针，其特征在于：包括检测PIK3CA基因E545K突变的上游引物F-E545、下游引物R-E545、野生型探针WP-E545和突变型探针MP-E545K，检测PIK3CA基因H1047R突变的上游引物F-H1047、下游引物R-H1047、野生型探针WP-H1047和突变型探针MP-H1047R，以及检测BRAF基因V600E突变的上游引物F-V600、下游引物R-V600、野生型探针WP-V600和突变型探针MP-V600E；所述上游引物F-E545的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示，所述下游引物R-E545的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示，所述野生型探针WP-E545的核苷酸序列如SEQIDNo.3所示，所述突变型探针MP-E545K的核苷酸序列如SEQIDNo.4所示；所述上游引物F-H1047的核苷酸序列如SEQIDNo.5所示，所述下游引物R-H1047的核苷酸序列如SEQIDNo.6所示，所述野生型探针WP-H1047的核苷酸序列如SEQIDNo.7所示，所述突变型探针MP-H1047R的核苷酸序列如SEQIDNo.8所示；所述上游引物F-V600的核苷酸序列如SEQIDNo.9所示，所述下游引物R-V600的核苷酸序列如SEQIDNo.10所示，所述野生型探针WP-V600的核苷酸序列如SEQIDNo.11所示，所述突变型探针MP-V600E的核苷酸序列如SEQIDNo.12所示；所述突变型探针MP-E545K的使用浓度为50nM，所述突变型探针MP-H1047R的使用浓度为30nM，所述突变型探针MP-V600E的使用浓度为10nM；所有引物的使用浓度为50nM；所有野生型探针的使用浓度为20nM。

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