申请/专利权人：大连医科大学

申请日：2023-12-25

公开（公告）日：2024-03-12

公开（公告）号：CN117683727A

主分类号：C12N5/10

分类号：C12N5/10;C12N15/113;C12N15/55;A61K35/39;A61P3/10;C12R1/91

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.29#实质审查的生效;2024.03.12#公开

摘要：本发明公开了一种GHR基因敲除的胰岛β细胞系及其构建方法和应用。所述构建方法包括：设计sgRNA构建CRISPRCas9质粒载体，培养细胞进行细胞转染，提取基因组进行基因编辑的检测，PCR扩增后进行PCR扩增产物测序及T载体连接测序；所述细胞转染包括培养细胞至融合度为70‑80％时更换新鲜培养基，使用小分子转染试剂溶解质粒DNA。本发明成功构建了GHR基因敲除的胰岛β细胞系，操作方法简单高效。

主权项：1.一种GHR基因敲除的胰岛β细胞系的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：设计sgRNA构建CRISPRCas9质粒载体，培养细胞进行细胞转染，提取基因组进行基因编辑的检测，PCR扩增后进行PCR扩增产物测序及T载体连接测序；所述细胞转染包括培养细胞至融合度为70-80％时更换新鲜培养基，使用小分子转染试剂溶解质粒DNA。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 大连医科大学 一种GHR基因敲除的胰岛β细胞系及其构建方法和应用

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