申请/专利权人：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所

申请日：2022-05-31

公开（公告）日：2024-03-12

公开（公告）号：CN114774459B

主分类号：C12N15/80

分类号：C12N15/80;C12N15/66;C12N1/15;C12N15/113;C12N15/56;C12R1/645

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.12#授权;2022.08.09#实质审查的生效;2022.07.22#公开

摘要：本发明提供一种香蕉枯萎菌CRISPRCas9基因编辑载体、制备方法及应用,该载体包括Cas9和sgRNA表达框；Cas9表达框中，包括PgpdA启动子、优化密码子Foc4‑Cas9和密码子Foc4‑Cas9两端携带的H2BNLS核定位信号；sgRNA表达框中，包括PolIII型5SrRNA启动子和gRNA序列N20；本发明构建的香蕉枯萎菌CRISPRCas9基因编辑载体，实现了香蕉枯萎菌Foc4的更高编辑效率的体内表达Cas9和sgRNA的质粒型CRISPRCas9基因编辑技术，操作简便且稳定，充分提高香蕉枯萎菌CRISPRCas9基因编辑效率。

主权项：1.一种香蕉枯萎菌CRISPRCas9基因编辑的载体，其特征在于：包括Cas9表达框和sgRNA表达框；所述Cas9表达框中，包括PgpdA启动子和两端携带H2BNLS核定位信号的密码子优化的Foc4-Cas9；所述两端携带H2BNLS核定位信号的密码子优化的Foc4-Cas9的编码基因的核苷酸序列由SEQIDNO.2所示的序列和SEQIDNO.1所示的序列，按5’至3’的顺序相连获得；所述sgRNA表达框中，包括PolIII型5SrRNA启动子和gRNA序列N20，所述gRNA序列N20的核苷酸序列选自SEQIDNO.12-14所示的序列；所述载体由所述PgpdA启动子启动Foc4-Cas9，所述PolIII型5SrRNA启动子启动gRNA表达。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 一种香蕉枯萎菌CRISPR/Cas9基因编辑载体、制备方法及应用

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