申请/专利权人:广东先康达生物科技有限公司
申请日:2024-02-20
公开(公告)日:2024-03-22
公开(公告)号:CN117736980A
主分类号:C12N5/077
分类号:C12N5/077;A61K35/32;A61P19/02;A61P19/08
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开
摘要:本发明公开了脂肪间充质干细胞转化成软骨细胞的诱导分化培养基及其应用;该诱导分化培养基的基础培养基中,含有营养液和诱导剂;营养液包括血替、非必要氨基酸、β‑巯基乙醇、青霉素链霉素、地塞米松、丙酮酸钠、抗坏血酸、亚硒酸钠、转铁蛋白、重组人胰岛素、β‑甘油磷酸盐及TGF‑β1;诱导剂包括氰胺、氯化翠雀啶及脂肪间充质干细胞来源的细胞外基质。诱导剂的组分氰胺和氯化翠雀啶,能通过上调聚集蛋白聚糖和胶原蛋白II的表达而达到刺激软骨细胞生成;诱导剂的组分细胞外基质ADSC‑ECM能增加软骨细胞之间的粘连性,增强软骨细胞之间的信号联系,促进软骨细胞的生长和代谢,大大提高了脂肪间充质干细胞分化软骨细胞的效率。
主权项:1.一种脂肪间充质干细胞转化成软骨细胞的诱导分化培养基,其特征在于,所述诱导分化培养基包括DMEM高糖或DMEMF12组分的基础营养基;在所述基础培养基中含有营养液和诱导剂;其中:所述营养液包含终浓度30~40vv%的血替、终浓度1.8~2.6vv%的非必要氨基酸、终浓度0.1~0.4vv%的β-巯基乙醇、终浓度0.5~2vv%的青霉素链霉素、终浓度8~18μM的地塞米松、终浓度2~4.5mM的丙酮酸钠、终浓度0.4~2mgL的抗坏血酸、终浓度2~8μgL的亚硒酸钠、终浓度4~16mgL的转铁蛋白、终浓度3~10mgL的重组人胰岛素、终浓度5~12mM的β-甘油磷酸盐及终浓度10~20μgL的TGF-β1;所述诱导剂包含终浓度50~250μM的氰胺、终浓度30~1200μM的氯化翠雀啶及终浓度10~20μgL的脂肪间充质干细胞来源的细胞外基质。
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