申请/专利权人：浙江华睿生物技术有限公司

申请日：2021-09-26

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN113862166B

主分类号：C12N1/19

分类号：C12N1/19;C12N15/81;C12P17/06;C12R1/865

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.02#授权;2022.01.21#实质审查的生效;2021.12.31#公开

摘要：本发明公开了一种构建柚皮素生产菌的方法，包括以下步骤：构建表达芳香族氨基酸合成模块的质粒A，构建表达香豆酸和桂皮酸生成模块的质粒B，构建表达柚皮素合成模块的质粒C，将质粒A、质粒B、质粒C转化入酿酒酵母BY4742中，从转化子中筛选得到能通过发酵生产柚皮素的工程菌。

主权项：1.一种构建柚皮素生产菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：A.构建表达芳香族氨基酸合成模块的质粒A，该质粒A用于中断酿酒酵母基因组中编码苯丙酮酸脱羧酶aro10的aro10基因，并且在酿酒酵母基因组中aro10基因位点整合编码DHAP合成酶aro4的aro4基因、编码分支酸变位酶aro7的aro7基因、编码五功能蛋白aro1的aro1基因、编码分支酸合酶aro2的aro2基因，质粒A的核苷酸序列为SEQIDNO:1；B.构建表达香豆酸和桂皮酸生成模块的质粒B，该质粒B用于中断酿酒酵母基因组中编码丙酮酸脱羧酶PDC5的pdc5基因，并且在酿酒酵母基因组中pdc5基因位点整合编码预苯酸脱氢酶TYR1的tyr1基因、编码苯丙氨酸解氨酶PAL2的PAL2基因、编码酪氨酸解氨酶TAL的TAL基因，质粒B的核苷酸序列为SEQIDNO:2；C.构建表达柚皮素合成模块的质粒C，该质粒C用于在酿酒酵母基因组中整合编码肉桂酸-4-羟化酶C4H的C4H基因、编码4-香豆酸-CoA连接酶4CL的4CL基因、编码查尔酮黄烷酮异构酶CHI的CHI基因、编码查尔酮合酶CHS的CHS基因，质粒C的核苷酸序列为SEQIDNO:4；D.将步骤A中得到的质粒A、步骤B中得到的质粒B、步骤C中得到的质粒C转化入酿酒酵母中，从转化子中筛选得到阳性克隆；E.从阳性克隆中筛选出产柚皮素的工程菌。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 浙江华睿生物技术有限公司 一种产柚皮素的酿酒酵母菌

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