申请/专利权人：山东省农业科学院

申请日：2022-03-08

公开（公告）日：2024-01-26

公开（公告）号：CN114525361B

主分类号：C12Q1/6895

分类号：C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.26#授权;2022.06.10#实质审查的生效;2022.05.24#公开

摘要：本发明涉及一种区分紫皮和黄皮洋葱的cDNA分子标记及其应用。本发明根据洋葱花青素合成酶基因序列设计引物，以30天苗龄紫皮、黄皮洋葱假茎为试材，提取总RNA，再反转录成cDNA，以Actin基因为对照进行花青素合成酶基因的差异表达分析，开发了区分紫皮和黄皮洋葱的cDNA分子标记，利用得到的cDNA分子标记能够快速、准确的区分紫皮和黄皮洋葱。并利用其它紫皮、黄皮洋葱品种对这一标记进行了验证。本发明获得了区分紫皮和黄皮洋葱的cDNA分子标记，可以应用于洋葱种子纯度鉴定，与传统种子纯度鉴定法相比，能快速、准确区分紫皮和黄皮洋葱，具有较大的商业应用价值，也可以应用于洋葱种质资源鉴定和辅助育种方面。

主权项：1.cDNA分子标记、引物和或试剂组合在洋葱种质资源鉴定和辅助育种方面的应用，其特征在于，所述cDNA分子标记长度为390bp，其序列如SEQIDNO.1所示；所述引物序列如下：正向引物ANS-F：5′-CTAACGATCAATCTAAAGGGA-3′反向引物ANS-R：5′-GCAGTATGAACGATAAGGCAC-3′；所述应用至少包括以下两方面：（1）将所述引物和或试剂组合用于鉴别紫皮和黄皮洋葱；（2）通过所述cDNA分子标记、引物和或试剂组合对洋葱种子的纯度进行鉴定；样本为：选取30天苗龄洋葱的假茎；扩增体系和反应程序：25μL体系，其中2×TaqPCRMasterMix12.5μL，模板2μL，上、下游引物各1μL，ddH2O8.5μL；反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性30sec，55℃退火45sec，72℃延伸30sec，30个循环；72℃延伸10min，4℃保存；PCR产物经1.2%琼脂糖凝胶进行电泳分离分析，溴化乙啶染色，凝胶成像系统自动成像；所述试剂组合中包括所述的引物。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 山东省农业科学院 一种区分紫皮和黄皮洋葱的cDNA分子标记及其应用

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