申请/专利权人：再少年(北京)生物科技有限公司

申请日：2023-12-14

公开（公告）日：2024-02-27

公开（公告）号：CN117398427B

主分类号：C12N5/077

分类号：C12N5/077;A61K36/537;A61K35/34;A61P9/04

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.02.27#授权;2024.02.02#实质审查的生效;2024.01.16#公开

摘要：本发明涉及包含iPS诱导定向分化成心肌细胞的药物组合在用于治疗心力衰竭中的应用。所述应用能够有效的治疗心力衰竭，进一步的将所述的诱导分化获得的心肌细胞与丹参注射液一起使用后具有较好的治疗心肌梗死的效果，将二者组合使用后可以有效地用于制备心力衰竭的药物组合，应用前景较好。

主权项：1.一种用于治疗心力衰竭的药物组合物，其特征在于由IPS诱导定向分化成的心肌细胞和丹参注射液组成；其中IPS诱导定向分化成的心肌细胞是采用如下方法制备获得：将皮肤成纤维细胞调整细胞数为1×106个，100μl电转缓冲液中加入3μlEpi5TMEpisomaliPSC重编程试剂盒中的重编程因子，采用常规电转染细胞按2ml孔接种于基质胶包被的6孔板中，置于培养箱中培养；并使用ReproTeSRTM重编程培养基隔天换液，转染后第8天，将细胞消化后重新接种在第5代小鼠成纤维细胞制作的饲养层上，培养18天，观察iPSCs可见典型的克隆，将ips克隆重新接种于基质胶包被的6孔板中，置于培养箱中培养，使用mTeSRTM培养基继续培养；根据CardioEasy®人心肌细胞分化试剂盒说明配制心肌分化完全培养基I、II、Ⅲ液，将制备的iPSCs细胞生长至80%融合时吸去原液，PBS清洗，加入2mL心肌分化完全培养基Ⅰ液，其中含有SKP2-3F2单克隆抗体终浓度200μgmL，48h后吸去旧液，PBS清洗后加入心肌分化完全培养基Ⅱ液，其中含有SKP2-3F2单克隆抗体终浓度为200μgmL；48h后更换为心肌分化完全培养基Ⅲ液，其中含有SKP2-3F2单克隆抗体终浓度200μgmL，37℃、5%CO2培养箱持续培养，每48h更换培养液，每次更换的培养液中均含有SKP2-3F2单克隆抗体终浓度200μgmL，直至观察到细胞搏动，即得分化的心肌细胞，所述的SKP2-3F2单克隆抗体其轻链可变区序列如SEQIDNO：1所示，重链可变区序列如SEQIDNO：2所示。

全文数据：

权利要求：

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