申请/专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所

申请日：2021-05-10

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN115322913B

主分类号：C12N1/19

分类号：C12N1/19;C12P7/04;C12R1/865

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.22#授权;2022.11.29#实质审查的生效;2022.11.11#公开

摘要：本发明公开了重组酿酒酵母及其构建方法和应用。该构建方法包括对出发酿酒酵母进行如下改造，得到重组酿酒酵母：A1、导入香叶醇合成酶基因ObGES基因；A2、导入法尼基焦磷酸合成酶基因96位和127位双点突变基因ERG20F96WN127W基因；A3、导入3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶基因tHMG1基因；A4、导入香叶醇还原酶基因OYE2基因；A5、导入橙花醇合成酶GmNES基因；A6、导入橙花基二磷酸合成酶SINDPS1基因。该构建方法通过异源表达、模块整合和分支截流调控法尼基焦磷酸合成酶，成功在酿酒酵母中实现了玫瑰精油微生物细胞工厂的构建。

主权项：1.一种重组酿酒酵母的构建方法，其特征在于：包括：对出发酿酒酵母进行1）或2）或3）改造，得到重组酿酒酵母：所述1）改造为如下A3、A5和A6改造；所述2）改造为在所述1）改造获得的重组酿酒酵母上进一步进行A1、A2、A3和A4改造；所述3）改造为在所述2）改造获得的重组酿酒酵母上进一步进行A1和A2改造；A1、导入香叶醇合成酶基因ObGES基因；A2、导入法尼基焦磷酸合成酶基因96位和127位双点突变基因ERG20F96WN127W基因，所述ERG20F96WN127W基因编码的ERG20F96WN127W蛋白质的序列如SEQIDNo.10所示；A3、导入3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因tHMG1基因；A4、导入香叶醇还原酶基因OYE2基因；A5、导入橙花醇合成酶GmNES基因；A6、导入橙花基二磷酸合成酶SINDPS1基因；对所述出发酿酒酵母还进行如下B1-B8改造：B1、将驱动法尼基焦磷酸合成酶基因ERG20基因的启动子替换为名称为pERG7的ERG7基因的启动子；B2、导入甲羟戊酸激酶基因ERG12基因；B3、导入异戊烯基焦磷酸异构酶基因IDI1基因；B4、导入MVAPP脱羧酶基因ERG19基因；B5、导入HMG-CoA还原酶基因HMGR基因；B6、导入3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶基因ERG13基因；B7、导入MVAP激酶基因ERG8基因；B8、导入乙酰辅酶A乙酰基转移酶基因ERG10基因。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国科学院天津工业生物技术研究所 产玫瑰精油的重组酿酒酵母及其构建方法和应用

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