申请/专利权人：南京兔牙生物科技有限公司

申请日：2022-08-22

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN115413649B

主分类号：A01N1/02

分类号：A01N1/02;A61B5/15;A61B5/153;C12Q1/6806

优先权：["20211213 CN 2021115189266"]

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.22#授权;2022.12.20#实质审查的生效;2022.12.02#公开

摘要：本发明涉及一种血浆保存液、采血管以及其在ctDNA检测中的用途，属于液体活检技术领域。包括：抗凝剂50‑200mgml、防腐剂50‑300mgml、醛淬灭剂10‑100mgml、细胞膜保护剂10‑80mgml、代谢抑制剂2‑35mgml、自由基捕获剂5‑50mgml、水。本发明中提供的血浆保存液能够有效地对采血样本进行保存，特别适用于ctDNA检测的样本处理过程，其具有存储时间长、避免ctDNA降解的优点。

主权项：1.血浆保存液在用于提高采血样本中cfDNA提取量的应用，其特征在于，具体操作步骤如下：将血浆保存液加入采血管中并包装，每管中加入量为1.5ml，然后将采血管在15℃货架存储；使用前，采集血液样本加入至采血管中，30-35℃下保存7天后，检测cfDNA提取量；血浆保存液是由如下成分组成：抗凝剂50-200mgml、防腐剂50-300mgml、醛淬灭剂10-100mgml、细胞膜保护剂10-80mgml、代谢抑制剂2-35mgml、自由基捕获剂5-50mgml、水；所述的抗凝剂是EDTA钾盐；所述的防腐剂是重氮烷基脲；所述的醛淬灭剂是甘氨酸；所述的细胞膜保护剂是海藻糖和山梨醇的混合；所述的代谢抑制剂是金精三羧酸和二硫苏糖醇的混合；所述的自由基捕获剂是对硝基酚；所述的自由基捕获剂是通过将其负载于热胀型温敏水凝胶中而加入的；负载自由基捕获剂的热胀型温敏水凝胶的制备方法包括如下步骤：按重量份计，将N-异丙基丙烯酰胺10-15份、丙烯酰胺20-30份、N-羟甲基丙烯酰胺5-10份、交联剂0.5-1份、引发剂0.1-0.3份，加水300-350份进行共聚反应，产物洗涤后干燥，得到干凝胶；将干凝胶在含有自由基捕获剂的乙醇水溶液中浸泡，再减压干燥后，得到负载自由基捕获剂的热胀型温敏水凝胶；所述的交联剂是N,N-亚甲基双丙烯酰胺，所述的引发剂是过硫酸钾或者亚硫酸氢钠中的一种或两种的混合；共聚反应是在15-25℃下水浴反应10-60min，浸泡过程是室温下浸泡10-100h；所述的干凝胶与乙醇水溶液的质量比是1：3-5；自由基捕获剂在乙醇水溶液中的质量百分比是5-10%；乙醇水溶液中乙醇的体积比是30-50%。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京兔牙生物科技有限公司 一种血浆保存液、采血管以及其在ctDNA检测中的用途

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