申请/专利权人：重庆医科大学

申请日：2023-12-11

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN117701682A

主分类号：C12Q1/6816

分类号：C12Q1/6816;C12Q1/6876

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.02#实质审查的生效;2024.03.15#公开

摘要：本发明公开了一种基于发夹探针激活CRISPR‑Cas12a系统的方法，包括以下步骤：制备发夹探针；将crRNA和Cas12a蛋白混合后，加入反应缓冲液、发夹探针、F‑Q探针、核糖核酸酶抑制剂混匀，最后加入靶miRNA，孵育后终止酶反应；所述发夹探针的环部区域为miRNA的识别域，茎部区域为crRNA的结合域，所述发夹探针中无PAM序列；当靶miRNA与所述发夹探针的环部区域杂交后，引发crRNA与发夹探针的茎部区域相结合，从而激活CRISPR‑Cas12a系统的顺式和反式剪切活性。本发明通过设计一种不含PAM序列的发夹探针作为CRISPR‑Cas12a的触发底物，在靶miRNA存在时，通过CRISPRCas12a系统激活的反式剪切活性剪切荧光信号探针，可实现一步反应对miRNA的快速、灵敏检测。

主权项：1.基于发夹探针激活CRISPR-Cas12a系统的方法，其特征在于，包括以下步骤：制备发夹探针；将crRNA和Cas12a蛋白混合后，加入反应缓冲液、发夹探针、F-Q探针、核糖核酸酶抑制剂混匀，最后加入靶miRNA，孵育后终止酶反应；所述发夹探针的环部区域为miRNA的识别域，茎部区域为crRNA的结合域，所述发夹探针中无PAM序列；当靶miRNA与所述发夹探针的环部区域杂交后，引发crRNA与发夹探针的茎部区域相结合，从而激活CRISPR-Cas12a系统的顺式和反式剪切活性。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 重庆医科大学 基于发夹探针激活CRISPR-Cas12a系统的方法及其应用

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD