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【发明授权】一种用于检测人EGFR基因突变的数字PCR试剂盒_新羿制造科技(北京)有限公司_202110845845.0 

申请/专利权人:新羿制造科技(北京)有限公司

申请日:2019-10-15

公开(公告)日:2024-04-12

公开(公告)号:CN113584132B

主分类号:C12Q1/6827

分类号:C12Q1/6827;C12Q1/686;C12N15/11

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.04.12#授权;2021.11.19#实质审查的生效;2021.11.02#公开

摘要:本发明提供一种用于检测人EGFR基因突变的数字PCR试剂盒,所述数字PCR试剂盒包括在同一反应管数字PCR反应体系中同时检测多种Ex19Del突变和L858R突变,其中Ex19Del位点使用多条ARMS引物识别突变型,L858R位点使用TaqMan荧光探针识别野生型和突变型;进行PCR扩增后,通过荧光信号位置和强度检测Ex19Del突变型、L858R突变型和L858R野生型,并对其直接进行绝对定量。本发明的试剂盒通量高、成本低,实现了Ex19Del25位点和L858R位点合为一管检测,提高了检测通量,降低了试剂耗材成本。

主权项:1.引物和探针组合在制备检测人EGFR基因突变的数字PCR试剂盒中的应用,其特征在于,所述引物和探针组合包括在同一反应管数字PCR反应体系中同时检测多种Ex19Del突变和L858R突变的引物和探针,其中Ex19Del位点使用多条ARMS引物识别突变型,L858R位点使用TaqMan荧光探针识别野生型和突变型;进行PCR扩增后,通过荧光信号位置和强度检测Ex19Del突变型、L858R突变型和L858R野生型,并对其直接进行绝对定量;检测多种Ex19Del突变使用的引物探针组合如下: ;检测多种Ex19Del突变使用的引物探针组合还包括一条跨缺失区的长封闭探针,这条长封闭探针与野生型完全互补,并覆盖了ARMS引物区域,探针3’端用磷酸基团标记,避免探针向下延伸;所述封闭探针为SEQIDNO:13:CGTCGCTATCAAGGAATTAAGAGAAGCAACATCTCCGAA;L858R突变检测的引物和探针如下: 。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 新羿制造科技(北京)有限公司 一种用于检测人EGFR基因突变的数字PCR试剂盒

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